文中以上海申安医疗器械厂生产的LDZX-75KBS灭菌器对样品的灭菌,用实验说明对样品灭菌的实际效果。
1、模拟实际灭菌情况
蓝盖试剂瓶包装:将留点温度计放入500ml蓝盖试剂瓶内,拧紧盖子后旋松半圈(模拟蓝盖试剂瓶内生物污染样本灭菌 )。试管包装:将留点温度计放入50ml试管内,轻轻旋上胶塞 ( 模拟产生于玻璃管内生物污染样本灭菌 )。生物垃圾袋包装方式 : 将温度计放入密封生物垃圾袋中 ( 模拟直接放于生物垃圾袋内的物品灭菌 )。申安LDZX-75KBS灭菌器内载物量为满负荷条件下,设置灭菌温度为121℃、灭菌时间为80min,记录各个时间点灭菌对象中心部位温度,计算不同载物量灭菌延迟时间。
2、验证实际灭菌效果
将生物指示剂管置于蓝盖试剂瓶、试管和生物垃圾袋内,并置于申安LDZX-75KBS灭菌器的中层的中央位置,灭菌器满负荷运转。设定灭菌温度121℃灭菌时间20min,并启动。经过一个灭菌周期后取出,直接将生物指示剂放于56℃~ 60℃培养箱中培养7天,取另一支未灭菌的指示剂作为阳性对照同时培养。培养后观察结果,如若经灭菌处理指过示剂保持紫色,即为灭菌合格;若由紫色变为黄色,即为灭菌不合格(同时阳性对照管应由紫色变为黄色)。
3、结果
不同装载量及放置位置下的结果 :观察结果留点温度计不做任何包裹的情况下,在不同放置位置及不同载量的情况下,计算出灭菌延迟时间T值均为0。由于申安LDZX-75KBS灭菌器设定灭菌时间即为灭菌对象中心部位达到灭菌温度的时间,不存在时间差,即该条件因素不影响灭菌延迟时间。在满载条件下,各个包装方式内部温度到达设定温度的时间存在较大差异。蓝盖试剂瓶包装内污染物,其灭菌延迟时间为19min; 试管包装的条件下,计算得灭菌延迟时间为45min;生物垃圾袋包装条件下,计算得灭菌延迟时间为26min。
4、申安LDZX-75KBS灭菌器实际灭菌效果检测结果
在脉冲式压力蒸汽灭菌器满载条件下,模拟实际灭菌工作中的情况,主要针对蓝盖试剂瓶、试管以及生物垃圾袋等3种灭菌包装方式内的污染物进行同时灭菌,将脉冲式压力蒸汽灭菌器设定灭菌温度121℃灭菌时间20min,进行灭菌,灭菌结束后各种包装内的生物指示剂培养后均为阳性,结果表明设定灭菌时间为20min时灭菌无效。
在对脉冲式压力蒸汽灭菌器的实际使用过程中,灭菌延迟时间会因多种因素而不同,例如,灭菌器的类型、蒸汽排出的方式、灭菌物品的位置、灭菌物品装载量以及灭菌物品包装方式等。因此,实验室应对正在使用的压力蒸汽灭菌器进行灭菌延迟时间的计算,特别是对于高级生物安全实验室中使用的压力蒸汽灭菌器。在设定灭菌时间参数时,需考虑灭菌过程中各个因素对灭菌延迟时间的影响,应适当增加灭菌时间,以确保能够达到灭菌效果。