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上海申安论述检测水质大肠菌的方法!
导读:本文上海申安医疗器材厂解析了快速检测水质中大肠菌群含量的方法。
来源:未知
发布日期:2019-08-08 16:41【
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上海申安总大肠菌群是衡量水质状况的重要指标之一。总大肠菌群包括大肠杆菌、大肠菌等多种长期存在于人体肠道的细菌,因此,在人体粪便中存在大量的总大肠菌群,可以作为水质衡量标准,如总大肠菌群含量超过国家标准,则表示水质被污染,可能存在致病风险。在传统的水质监测种,常以多管发酵法、平板计数法进行检测,该方法费时费力,在水样较多且时间有限的情况下,难以满足水质总大肠菌群快速检测的要求。1995年,德国学者FJ·Forg发明了纸片法,能够实现总大肠菌群的快速检测,将水质检测时间由多管发酵法的72h缩短到24h,材料成本大幅度降低,并有效简化了操作流程,取得了良好的应用实践效果。本文上海申安医疗器械厂深入研究了纸片法在检测水质总大肠菌群含量测定中的应用,并与常规的平板计数法进行对比研究。
1纸片法原理
纸片法是以滤纸片、纸膜和胶片等作为培养基载体,并加入适量的氯化三苯四氮(TTC)溶于水中制备成的无色溶液。由于细菌细胞内含有脱氢酶,在脱氢酶的作用下,TTC接受氢生成红色且不溶于水的三苯甲胺,三苯甲胺性状较为稳定且不会自动氧化,能够使菌落呈现红色标记。同时,在纸片培养基中加入乳糖和澳甲酚紫,菌群分解乳糖产酸会导致澳甲酚紫产生颜色变化,菌落周围产生黄圈,大肠菌群菌落呈现红斑黄圈,以此作为大肠菌落检测的判定标准。
2试剂与设备
本实验采用自制纸片方法,选用中速定性厚滤纸、中速定性薄滤纸,为杭州新华纸业公司生产,采用北京奥博星公司生产的酵母提取物,TTC为上海青析公司生产,溴甲酚紫为上海三爱思公司生产。实验仪器包括:电热鼓风干燥箱DHG-9240A,购于上海智诚分析仪器公司,立式压力蒸汽灭菌器LDZF-75KB-Ⅱ,购于上海申安医疗器械厂,S220多参数测试仪购于梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司
上海申安LDZF-75KB-II立式压力蒸汽灭菌器
3结果与讨论
通过平板计数法、自制纸片和3M纸片进行总大肠菌群检测,得出结果如下:
上海申安医疗器材厂通过对比分析纸片法与平板计数法,检测结果无统计学意义,没有显著差异。同时,由于自制纸片存在一定的间隙,如菌体处于纤维之间时,可能出现未计数的情况,由此造成一些情况下纸片法菌群计数量稍小于平板计数法。过量TTC试剂对细菌有抑制作用,通过对比研究,自制纸片时培养基中TTC含量应控制在80左右。同时,在培养基中加入5mg/mL的葡萄糖和3mg/mL的牛肉浸膏,能够有效提高自制纸片检测的灵敏度。与多管发酵法、平板计数法相比,纸片法具有携带方便、检测方法简单、准确度高、成本低等特点,易于消毒保存,便于运输,加之纸片法使用中没有废液、废气产生,使用后可焚烧销毁,大大降低了对环境的污染,减少了试验后清洗工作量,适用于实验条件不满足的企业、单位作为水质监测手段日常使用。
以上内容仅供参考。
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