某细胞培养用到的灭菌锅LDZX-50KBS
导读:细胞培养实验需要准备哪些仪器设备和相关试剂耗材呢,立式压力灭菌器也是不可少的灭菌仪器,上海申安医疗器械厂生产的LDZX-50KBS性价比好,灭菌用仪器。
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发布日期:2020-04-09 20:06【大 中 小】
细胞培养等实验需要用到的仪器都需要哪些呢:包括电子天平,瑞士Mettler Toledo公司;HH-1恒温水浴锅;DGG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱;LDZX-50KBS立式压力灭菌器;37XC型倒置显微镜;生物安全柜;GPST200型CO2恒温恒湿培养箱;水浴氮吹仪;6890N型气相色谱仪,美国Agilent公司;全波段酶标仪,美国BioTek公司;NikonECLIPSETi-U荧光倒置显微镜,日本Nikon公司,实验材料:人肝细胞株LO2,购自武汉普诺赛生命科技有限公司;胎牛血清( FBS) ;培养基,均购自以色列Biolnd公司;青霉素、链霉素、胰蛋白酶和噻唑蓝( MTT) ,均购自北京索莱宝科技有限公司;反棕榈油酸标准品,购自上海安谱实验科技股份有限公司;油酸标准品,购自上海阿拉丁试剂有限公司;牛血清白蛋白( BSA) ,购自美国Sigma公司;脂质氧化( MDA) 检测试剂盒、超氧化物歧化酶( SOD) 活性检测试剂盒、活性氧( ROS) 检测试剂盒、BCA检测试剂盒,均购自碧云天生物技术研究所; 甘油三酯检测试剂盒、胆固醇检测试剂盒、油红染液,均购自南京建成科技有限公司。
实验方法:细胞培养,将解冻后的LO2细胞加入含FBS、青霉素和链霉素的培养基中,置于培养箱中培养,待细胞长至90%时,用磷酸盐缓冲液洗涤细胞两次,加入胰蛋白酶、去掉消化液加入培养基将细胞吹至单细胞悬液,分装到新的培养瓶,放置到培养箱中继续培养,传至两代后用于实验。消化吹至单细胞悬液,将细胞浓度稀释到105个/mL,接种于96孔板,每孔加入200μL,每个浓度设置6个平行。将96孔板放至 5%CO2、37℃培养箱中12h,然后加入反棕榈油酸至不同浓度,脂肪酸储存液是与不含脂肪酸的结合配制,稀释成不同浓度用于实验,另外设置与实验组BSA浓度相同的对照组。处理24h后加入20μLMTT溶液( 5μg/mL) ,继续置于37℃ 处理4h,最后去掉处理液加入150μLDMSO,振荡混匀10min,于490nm测定各组OD值。
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